Dihydroethidium, CAS broj 104821-25-2, molekularna formula C21H21N3, s preciznom molekularne težine od 315,41, važan je spoj s opsežnim biološkim primjenama. Obično se pojavljuje kao fini kristalni prah u rasponu od ružičaste do ljubičaste. Ova jedinstvena boja olakšava prepoznavanje u laboratoriji i pruža prirodnu fluorescentnu pozadinu za svoju upotrebu kao fluorescentna sonda. U hemijskom i biološkom istraživanju često se koristi kao sonda za otkrivanje reaktivnih kisika, posebno u otkrivanju intracelularnih supeksidnih anija, pokazujući izuzetno visoku efikasnost. Ova boja može slobodno ući u ćelije i dehidrogenata za formiranje etidijevog bromida. Ova sonda se široko koristi u NK ćelijama i kao važna boja za identifikaciju širećih širivanja i hipoksije u tumorima.
|
|
|
|
Hemijska formula |
C56H92O29 |
|
Tačna masa |
1229 |
|
Molekularna težina |
1229 |
|
m/z |
1229 (100.0%), 1230 (60.6%), 1231 (18.0%), 1231 (6.0%), 1232 (3.6%), 1232 (3.5%), 1230 (1.1%), 1233 (1.1%), 1230 (1.1%) |
|
Elementalna analiza |
C, 54.71; H, 7.54; O, 37.74 |
Dihydroethidium, kao plava fluorescentna sonda koja može prodrijeti u ćelijama, igra važnu ulogu u oblastima biologije i medicine. Njegova jedinstvena svojstva fluorescencije omogućuju mu da otkrije nivoi superoksidnih anija (O2-) unutar ćelija, čime se otkriva mehanizmi reaktivne vrste kisika u ćelijskoj fiziologiji i patologiji.
1. Snimanje mobitela
Dihidroetilen, kao fluorescentna sonda, može ući u ćelije i vezati se za DNK, emitiraju crvenu fluorescenciju. Stoga se široko koristi u tehnologiji za snimanje mobitela za nadgledanje redox statusa unutar ćelija u stvarnom - vrijeme. Kroz opremu kao što je fluorescentna mikroskopija ili protočna citometrija, istraživači mogu promatrati distribuciju i promjene dihidroetilendiamine u ćelijama, čime se razumije redox stanje ćelija u fiziološkim ili patološkim stanjima.
2. Redox detekcija stanja
Fluorescentna svojstva etilen dihidrogen ingota čine ga idealnim alatom za otkrivanje redox stanja. Unutar ćelija, dihidroetilendiamine se može oksidirati superoksidske anioni za formiranje etilendiamina, koje se zatim veže za DNK i emitira crvenu fluorescenciju. Stoga, otkrivanjem intenziteta fluorescencije dihidroetilendiamine, nivo intracelularnih supeksida može se indirektno odraziti, čime se procjenjuje redox status ćelija. Ova metoda otkrivanja ima prednosti visoke osjetljivosti, specifičnosti i visokog - propusnosti, pružajući snažan alat za proučavanje dinamičkih promjena staničnog stanja ćelijske redox.
3. Istraživanje tumora
Dihidroetilen ima širok spektar primjena u istraživanju tumora. Zbog visokih redox nivoa ćelija tumorskih stanica, dihidroetilendiamin može poslužiti kao efikasan tumorski marker za ranu dijagnozu i terapijsku procjenu tumora. Pored toga, dihidroetilendiamina se može koristiti i za proučavanje bioloških procesa proliferacije tumorskog ćelija, apoptoze i invazije, pružajući važne tragove za otkrivanje mehanizama i razvoja tumora.
4. Screening lijek
DihydroethilendiaMine također igra važnu ulogu u skriningu lijekova. Mnogi lijekovi, dok vrše terapijske efekte, imaju utjecaj i na redox stanje ćelija. Stoga, otkrivanjem intenziteta fluorescencije dihidroetilendiamine, može se procijeniti utjecaj lijekova na stanu statusu Cellular Redox, a potencijalni terapijski lijekovi mogu se prikazati. Pored toga, dihidroetilendiamin se može koristiti i za proučavanje mehanizma interakcije između lijekova i tumornih ćelija, pružajući snažnu podršku za razvoj droga i kliničke primjene.
5. Procjena biološke sigurnosti
Dihidroetilena se može koristiti i u polju procjene biološke sigurnosti. Pod utjecajem zagađivača zaštite okoliša i toksina, redox stanje ćelija može se promijeniti. Otkrivanjem intenziteta fluorescencije Dihidroetilendiamine, može se ocijeniti utjecaj ovih tvari na stanični status redox, čime se procjenjuje njihovu biološku sigurnost. Ova metoda je od velikog značaja za procjenu potencijalnih rizika zagađivača zaštite okoliša i osiguravanje zdravlja ljudskog zdravlja.
Detaljni koraci i odgovarajuće hemijske jednadžbe za sintezu oddihydroethidiumU laboratoriji su proces koji uključuje organsku hemijsku sintezu.
1. Priprema sirovina
Početni materijali: Odaberite odgovarajući početni materijal, koji može biti spoj koji sadrži benzenski prsten i amino grupu.
Otapala i katalizatori: Odaberite odgovarajuća otapala (poput etanola, metanola itd.) I katalizatori (poput tranzicijskih metalata) na osnovu vrste reakcije.
2. Reakcija prvog koraka: uvod i modifikacija benzenskog prstena
Tip reakcije: reakcija zamjene ili spojnu reakciju aromatskih ugljovodonika.
Specifični koraci: Pod djelovanjem katalizatora, početni materijal reagira odgovarajućim benzenskim prstenom koji uvode reagense (poput fenilne kiseline, halogeniranog benzena itd.) Za uvođenje crnka.
Hemijska jednadžba: Zbog nepoznate strukture određenih reaktanata i proizvoda, opća formula se ovdje koristi za predstavljanje:
Pokretanje materijala + benzenski prsten Uvod Reagent → Intermedijarni proizvod 1
3. Reakcija drugog koraka: uvod ili izmjena amino grupa
Vrsta reakcije: reakcija aminacije ili reakcija amine zamjene.
Specifični koraci: pod odgovarajućim uvjetima reagirati srednji proizvod 1 s aminacijskim reagensima (poput amina, azida itd.) Za uvođenje ili izmjenu amino grupa.
Hemijska jednadžba:
Srednji proizvod 1+ Aminacija reagensa → srednji proizvod 2
4. Reakcija trećeg koraka: reakcija hidrogenacije
Tip reakcije: reakcija hidrogenacije.
Specifični koraci: Pod djelovanjem katalizatora (poput platine, paladija itd.) I vodonik plina, srednji proizvod 2 je hidrogeniran za dobivanje dihidroetilena ingota ili njegovih analoga.
Hemijska jednadžba:
Srednji proizvod 2+ H2 → dihidroetilen ingot (ili slično)
5. Pročišćavanje i karakterizacija
Pročišćavanje: Pročistite proizvod kroz metode poput recistallizacije i kromatografije stupca.
Karakterizacija: Koristite tehnike kao što su masovna spektrometrija, infracrvena spektroskopija i nuklearna magnetska rezonanca za karakterizaciju proizvoda i potvrditi njegovu strukturu i čistoću.
Dihydroethidium(Dhe) je fluorescentna sonda koja se široko koristi u biološkom istraživanju. Njegova jedinstvena svojstva fluorescencije daju mu značajne prednosti u otkrivanju unutarćelijskih reaktivnih vrsta kisika (posebno supeksida). Slijedi detaljan uvod u fluorescentna svojstva etilen dihidrogena ingota:
Sama dihidroetilen je ne-fluorescentni spoj, ali kada uđe u ćelije, može se oksidirati intracelularne supeksidne anije (o ₂ ⁻), na taj način se pretvaraju u etilen. Etilen glikol je fluorescentni spoj koji se može vezati za DNK i RNA. Stoga je, kada je dihidroetilen glikol oksidiran u etilen glikol, vezati će se na nukleinske kiseline u ćelijama i emitirati jaku crvenu fluorescenciju.
Postoji značajna promjena u spektralnim karakteristikama fluorescencije dihidroetil ingota prije i nakon oksidacije. Kada se ne oksidira, sam dihidroetil ingot ne emituje fluorescenciju. Kada je oksidiran u etilen oksid, njegova maksimalna valna dužina uzbuđenja obično je oko 488nm ili 530nm, a njegova maksimalna talasna dužina emisije iznosi oko 610nm. Zbog toga je kompatibilan sa sustavima filtriranja uobičajenih fluorescentnih mikroskopa ili citometra protoka, olakšavajući fluorescentnu sliku i kvantitativnu analizu.
Intenzitet fluorescencije dihidroetil sulfata pozitivno je u korelaciji sa nivoom unutarćelijskih supeksida. Kada se koncentracija intracelularnih supeksidnih aniona poveća, više dihidroetilendiamine je oksidirano za etilendiamin, što se veže na nukleinske kiseline i emitira jače fluorescentne signale. Stoga, otkrivanjem intenziteta fluorescencije dihidroetilendizene, nivo unutarćelijskih supeksida može se indirektno odraziti.
Fluorescentni kompleks formiran kombinacijom dihidroetilena glikola i nukleinske kiseline imaju visoku stabilnost i nije lako izbijeljena ili enzimski hidrolizirana. To rezultira dobrom fluorescenskom stabilnošću dihidroetilena glikola u dugom - termin ili kontinuirano praćenje eksperimenata, koji je koristan za tačno ocjenjujući dinamičke promjene intracelularnih supeksidnih anijalnih anija.
Upotrebom fluorescencije etilendiamina, istraživači mogu koristiti tehnike snimanja poput fluorescentne mikroskopije ili crnometriju protoka za nadgledanje i analizu nivoa unutarćelijskih supeksida u stvarnom - vrijeme. Ova metoda ima prednosti visoke osjetljivosti, specifičnosti i visoke - propusnost, pružajući snažan alat za otkrivanje mehanizama reaktivne kisik vrste u staničnoj fiziologiji i patologiji.
Dihydroethidium (dihidroetijum, dhe) doista je ćelija - propusna plava fluorescentna sonda koja se uglavnom koristi za otkrivanje superoksidne radikalne anion (O2-) u ćelijama. Slijedi princip njenog otkrivanja i njegovih prijava u biološkom istraživanju:
Princip otkrivanja
Dhe može biti dehidrogeniran intracelularnim superoksidnim anionima za proizvodnju etidija (npr. Etidijev bromid) nakon što su ugušili žive ćelije. Etidijum se može vezati za RNA ili DNK za proizvodnju crvene fluorescencije. Kada je nivo intracelulalnog superoksida veći, proizvedeno je više etidija i crvena fluorescencija je jača; Suprotno tome, slabiji je. To omogućava otkrivanje nivoa siveroksidnih aniona sa Dhe. Istovremeno, sam fluorescira plavu u citoplazmi dok se ne oksidira, a zatim će biti umetnut u mobilni DNK, obojite jezgre jarko fluorescentne crvene boje.
Primjeri aplikacija
Detekcija proizvodnje ROS-a u tkivu jetre: Odjeljci tkiva jetre pripremaju se i inkubiraju sa Dheom. Odjeljci se zatim primjećuju pomoću fluorescentnog mikroskopa i postotka pozitivnih ćelija Dhe - izračunava se kvantitativnom morfometrijskom analizom za procjenu rosa (reaktivne vrste kisika) proizvodnje.
Istražiti promjene u antioksidantnim enzimima i glutatione Redox statusom CD-a u hipoksičnim i normoksičnim stanjima: u ovoj studiji, superoksid O2 - bio je označen pomoću DHE-a, a zatim testiran u toku. Rezultati su pokazali da je sadržaj kisika imao utjecaja na generaciju supeksida i peroksida, s većom brzinom proizvodnje peroksida u normoksičnom stanju.
Gore navedeni principi i prijava pokazuju da je Dhe, kao superoksidni anion fluorescentna sonda, ima širok spektar primjene u području biološkog istraživanja. Ne može se koristiti samo za procjenu nivoa oksidativnog stresa u ćelijama, ali također pružiti važnu osnovu za mehanizam bolesti i razvoj antioksidativnih lijekova.
Granice u istraživanju
► Dizajn radioaktivnog - označene sonde
Da bi se omogućilo u Vivo dinamičkoj praćenju superoksida, istraživači su razvili ¹¹c - s oznakom iz derivata. Minimiziranjem strukturnih modifikacija (uvođenje bromina atoma samo u benzenski prsten), sačuvana je hemijska i biološka svojstva Dhea. Snimanje kućnih ljubimaca otkrilo je da je ova sonda izložila četverostruku veću upotrebu u ishemijskom miokardu u odnosu na zdravo tkivo, pokazujući značajnu povezanost sa intenzitetom fluorescencije (r =0.92, str.<0.001), thereby providing a novel tool for early diagnosis of cardiovascular diseases.
► Razvoj mitohondrije - ciljanih sondi
Da bi se bavio potrebama za mitohondrijskim otkrivanjem supeksida, istraživači sintetizirao mitosox crveno (mitohondrija - lokalizirani analogni DHE). Ova sonda cilja mitohondriju preko tripenilfosfijskog djela, s njegovim oksidacijskim proizvodima koji emitiraju narančaste - crvene fluorescencije (510/580 nm). U modelima Parkinsonova bolesti, Mitosox Crvena detekcija otkrila je da su koncentracije mitohondrijske superoksidne koncentracije u Subvenciji Nigra dopaminergički neuroni povišeni pet puta u odnosu na normalne razine, pojavljuju se ranije od apoptotskih markera. To pruža biomarkeru za ranu intervenciju u neurodegenerativnim bolestima.
Popularni tagovi: Dihydroethidium CAS 104821-25-2, dobavljači, proizvođači, tvornica, veleprodaja, kupuj, cijena, sajta, prodaja